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    最牛的转基因大豆什么样子?

    时间:2018-09-14 11:42来源:6维度转载 作者:生物科技科普 浏览: 次    收藏 挑错 推荐 打印
    摘要:你知道转基因大豆是怎么来的吗?今天来点专业的科普。

    孟山都公司2018年3月8日宣布,公司的Intacta 2 Xtend转基因大豆正式获得巴西批准。之前公司曾预测该批准有望在4月份获得。Intacta 2 Xtend转基因大豆具有耐麦草畏和草甘膦的性状,还可以抵抗部分鳞翅目害虫的侵袭。预计该款大豆将于2020年开始在巴西销售。公司介绍,Intacta 2 Xtend是孟山都传统草甘膦大豆Intacta RR2 Pro的接班产品,Intacta RR2 Pro同时具有抗虫和耐草甘膦特性,但是没有耐麦草畏特性。巴西作为全球第二大大豆生产国和最大的油料种子出口国,是孟山都非常重要的市场。孟山都目前已经开始在巴西向农民推介Intacta 2 Xtend大豆,这目前应该是世界上最牛的转基因大豆了。

    你知道转基因大豆是怎么来的吗?今天来点专业的科普。

    介绍一种采用农杆菌介导的子叶节转化法。农杆菌菌株为EHAl05,双元载体质粒以pCAMBIA3300为骨架,构建由强组成型启动子E12、CaMV35S调控的植物表达载体pCBA1,目的基因为野生大豆基因Al,筛选标记基凶为除草剂抗性Bar基因。

    挑取含有目的基因的农杆菌单菌落或冻存管农杆菌,按1:100的比例接种于含有抗生素的YEP液体培养基上,200 r·min-1振荡培养过夜,进行一次活化。二次活化按1:10的比例振荡培养6-8 h,即可用于侵染。侵染前,将活化好的农杆菌菌液分装到50 mL的离心管中,每管约40 mL,4 000 r·min-1,离心5 min,菌体沉淀用等体积的菌体重悬培养基REM重悬菌苗的获得及外植体的制备技术流程:挑选粒大、饱满、无病斑的成熟种子,采用氯气消毒法灭菌。在超净工作台内将种子吹至无明显氯气味道后,接种在萌发培养基GM上,温度为(24±1)℃,每天光照16 h。种子萌发5 d后,幼苗可用作下一步外植体制备。取5 d苗龄的无菌苗,去掉种皮,保留子叶及下方的下胚轴,用解剖刀将2片子叶沿下胚轴的方向平行切开,去除所有的芽,分别在子叶节有效分化部位划5-7刀,将外植体转入PCM培养基中培养1 d。

    农杆菌的侵染及共培养。将制备好的子叶节外植体,放入装有工程重悬液的三角瓶中,大约每30ml菌液40个子叶外植体,负压5min,侵染30min。侵染结束后,用无菌滤纸吸干子叶节外植体表面的菌液,然后将其近轴面向下放入含有30mlCCM的90×15mm的培养基中(CCM上附有一层无菌滤纸),24℃黑暗培养3d。

    不定芽诱导:共培养3 d后,用液体不定芽诱导培养基SIM清洗除去子叶节外植体表面的农杆菌。用无菌滤纸吸干子叶节外植体表面多余水分后即可转入SIM培养基中进行不定芽诱导培养,14 d后,取出外植体,将下胚轴与培养基接触部分切出新的伤口,转人含有相应浓度筛选剂草甘膦的芽诱导培养基中。

    不定芽伸长:不定芽诱导28 d后,转入不定芽伸长培养基中,每14 d继代1次,直到不定芽伸长到3-5 cm。

    诱导及驯化、移栽:当不定芽伸长到3-5cm之间时。将其从基部切下,在1 mg·ml-1 IBA中蘸1-2 min后,转入RM中进行生根培养。 当根长至约2-3 cm时,移栽到混合土(蛭石:珍珠岩:上层土壤=1:1:1),散射光下覆膜保湿培养。25℃,约3-5 d后转入正常光下培养。

    提取抗性植株的DNA,进行Bar基因的PCR分析,如果能扩增出条带即为阳性苗。

    (责任编辑:窦虹)

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